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小鼠心肌細胞具體操作規(guī)程是這樣的

更新時間:2022-06-23點擊次數(shù):1285
       小鼠心肌細胞根據(jù)其生理功能可分為兩類,即工作性心肌細胞和傳導(dǎo)性心肌細胞。其中工作性心肌細胞構(gòu)成心房肌和心室肌,是心壁的主要組成部分,具有興奮、傳導(dǎo)和收縮的功能;而自律性心肌細胞組成心臟的傳導(dǎo)系統(tǒng),包括竇房結(jié)、結(jié)間束、房室交界、左右束支和普肯耶纖維網(wǎng)。
  小鼠心肌細胞操作規(guī)程:
  一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
  1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
  2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
  3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
  二.細胞處理:
  1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
  2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
  對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
  方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
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