欧美视频在线播放-欧美视频在线播放bbxxx-欧美视频在线第一页-欧美视频在线观-欧美视频在线观看-欧美视频在线观看免费

新聞中心

News Center

當前位置:首頁新聞中心小鼠肝細胞分離技巧:提高細胞純度和存活率

小鼠肝細胞分離技巧:提高細胞純度和存活率

更新時間:2024-07-19點擊次數:1909

  小鼠肝細胞分離是生物醫學研究領域的一項基本技術,對于肝臟疾病機制研究、藥物篩選和細胞治療等具有重要意義。然而,肝細胞分離過程中的純度和存活率是影響實驗結果的關鍵因素。本文將分享一些實用的分離技巧,旨在提高小鼠肝細胞的純度和存活率。

  

  一、實驗前的準備工作

  1.選擇合適的實驗小鼠:選用健康、適齡的小鼠,一般選擇8-12周齡的成年小鼠,以保障肝細胞的活力。

  2.實驗材料準備:確保所有實驗器材無菌,包括手術器械、離心管、培養皿等。同時,準備好預冷的PBS緩沖液、酶消化液等試劑。

  3.環境控制:實驗過程中,保持實驗室溫度在22-25℃,以減少細胞應激反應。

小鼠肝細胞分離技術

 

  

  二、小鼠肝細胞分離步驟及技巧

  1.麻醉與消毒:采用戊巴比妥鈉對小鼠進行麻醉,剃毛并消毒手術部位。

  2.開腹與肝臟取材:沿小鼠腹部中線切開,暴露肝臟,用無菌眼科剪剪下肝臟,放入預冷的PBS緩沖液中。

  3.肝細胞消化:將肝臟剪成小塊,加入含有酶消化液的培養皿中,置于37℃水浴鍋中振蕩消化。

  

  以下為提高純度和存活率的技巧:

  a.酶濃度優化:根據肝臟的軟硬程度,調整酶消化液的濃度,避免消化過度或不足。

  b.消化時間控制:密切觀察肝臟組織的變化,一般在20-30分鐘內完成消化,避免時間過長導致細胞損傷。

  c.輕柔操作:在消化過程中,輕柔搖動培養皿,避免劇烈振蕩造成細胞損傷。

  

  4.細胞過濾與洗滌:消化結束后,用200目細胞篩過濾,去除未消化的組織塊。然后,用預冷的PBS緩沖液洗滌細胞,去除殘留的酶和雜質。

  

  三、細胞純化與存活率檢測

  1.差速離心法:將過濾后的細胞懸液低速離心(500rpm)去除紅細胞,再進行高速離心(1200rpm)獲得純凈的肝細胞。

  2.臺盼藍染色法:對分離得到的肝細胞進行臺盼藍染色,計算活細胞比例,評估細胞存活率。

  

  四、提高細胞純度和存活率的關鍵點

  1.無菌操作:全程嚴格無菌操作,防止細菌、真菌污染。

  2.預冷處理:所有試劑和器材均需預冷,降低細胞應激反應。

  3.短時間內完成操作:從肝臟取材到細胞分離,盡量在短時間內完成,減少細胞在體外環境中的損傷。

  

  小鼠肝細胞分離技術在生物醫學研究中具有重要價值。通過掌握上述技巧,我們可以在一定程度上提高肝細胞的純度和存活率,為后續實驗奠定堅實基礎。在實際操作過程中,還需不斷總結經驗,優化實驗方案,以獲得更高質量的肝細胞。

老子影院午夜伦不卡 | 影音先锋中文字幕人妻 | 国产av一区二区三区传媒 | 亚洲精品一区二区久 | 亚洲日韩一页精品发布 | 成人无遮挡18禁免费视频 | 亚洲av第一成肉网 | 久久久久高潮毛片免费全部播放 | 18禁无遮挡免费视频网站 | 2020阿v天堂网手机版 | 台湾佬自拍偷区亚洲综合 | 久久精品岛国av一区二区无码 | 久久婷婷人人澡人人爽人人爱 | 亚洲欧洲巨乳清纯 | 国产性生大片免费观看性 | 国产精品自产拍高潮在线观看 | 成人区人妻精品一区二区不卡视频 | 亚洲成在人线视av | 91精品乱码一区二区三区 | 亚洲国产精品一区二区久久 | 欧美巨大黑人极品精男 | 3d动漫精品啪啪一区二区免费 | 亚洲av综合永久无码精品天堂 | 欧美日韩国产综合草草 | 中国国语毛片免费观看视频 | 狠狠躁天天躁夜夜躁婷婷 | 无码精品日韩中文字幕 | 99re8这里有精品热视频免费 | 成人区人妻精品一区二区不卡 | 欧洲熟妇色xxxx欧美老妇老头多毛 | 熟女体下毛毛黑森林 | 黄色一级大片儿 | 他掀开裙子把舌头伸进去添视频 | 99国产精品久久久久久久成人 | 亚洲av最新在线网址 | 国产精品内射后入合集 | 精品欧美乱码久久久久久1区2区 | 玩弄放荡人妻一区二区三区 | 天堂…中文在线最新版在线 | 9999久久| 国产欧美性成人精品午夜 |